|
|
Fyziologická funkčnost preptinu a jeho analogů
Mrázková, Lucie ; Žáková, Lenka (vedoucí práce) ; Obšilová, Veronika (oponent)
Preptin je 34 aminokyselin dlouhý peptid, který je odvozený z pro-IGF2, kde se vyštěpuje z jeho E-domény a vzniká společně s maturovaným IGF2. V mojí diplomové práci jsme připra- vili dva plně dlouhé preptiny (myší a lidský) a 8 analogů preptinu (fragmenty s nebo bez olefi- nové metathese). Plně dlouhé preptiny, stejně jako preptinové fragmenty jsme syntetizovali syntézou peptidů na pevné fázi. Myší nebo lidský preptin nám sloužil jako referenční molekula pro srovnávání s výsledky biologických testů preptinových analogů. Všechny látky byly testo- vány na různé biologické aktivity, abychom více ozřejmili efekt preptinu jako možné biolo- gicky aktivní látky. Testovali jsme vliv na sekreci inzulínu v pankreatických β-buňkách, ne- přímo jsme zkoumali vliv na proliferaci kostních buněk a pokoušeli jsme se přiblížit odhalení možného receptoru pro preptin. Ze všech výsledků nám vyšlo, že ačkoliv má preptin nebo ně- které jeho analogy vyšší efekt než kontrolní vzorky, výsledky nejsou konzistentní a efekt není signifikantně vyšší. V hledání receptoru jsme neuspěli, přestože jsme s radioaktivně značeným preptinem udělali množství saturačních experimentů na mnoha typech buněk. Na začátku jsme vazebnými experimenty také vyloučili možnost, že je preptin schopen vázat se na stejné recep- tory jako IGF2, což...
|
|
|
New method of peptide separation using electrostatic binding
Palágyi, Attila ; Jindřich, Jindřich (vedoucí práce) ; Smrček, Stanislav (oponent)
Diplomová práce se týká vývoje nové metody separace syntetických peptidů pomocí elektrostatické vazby. Zabývá se vývojem linkeru s vícenásobně nabitou kotvou, který má schopnost se zachytit na syntetický peptid po jeho přípravě na pevné fázi. Následně zkoumá separaci za využití elektrostatické vazby, avšak po odštěpení peptidu z linkeru s vícenásobně nabitou kotvou a odchránění Boc chránících skupin pomocí TFA, vytvořil peptid tak silné elektrostatické interakce s katexem, že se nepodařilo ho z katexu získat. Práce je zakončena diskusí a návrhem na zlepšení metody. Klíčové slova: separace peptidů, syntéza peptidů na pevné fázi, SPPS, elektrostatické vázání
|
|
|
Analogy insulinu s řetězcem A prodlouženým o doménu D proteinů IGF-1 a IGF-2
Povalová, Anna ; Stiborová, Marie (vedoucí práce) ; Dračínská, Helena (oponent)
Insulin a insulinu příbuzné růstové faktory 1 a 2 (IGF-1 a -2) tvoří spolu se svými receptory komplexní systém, který ovlivňuje jak bazální metabolismus sacharidů, lipidů a bílkovin tak i buněčný růst, proliferaci, diferenciaci a apoptózu. Poruchy v působení insulinu a faktorů IGF mohou vést k závažným onemocněním jako je cukrovka či rakovinné bujení. Obě tyto choroby v současnosti představují jedny z největších zdravotních hrozeb pro světovou populaci. Insulin i oba IGF vyvolávají své biologické efekty prostřednictvím vysoce podobných receptorů, kterými jsou dvě isoformy receptoru insulinu (IR-A a IR-B) a receptor pro IGF-1 (IGF-1R). Na tyto receptory se hormony vážou s různými afinitami a vyvolávají rozdílné, ale i částečně se překrývající efekty, ať už metabolické (převážně insulin) nebo růstové (IGF i insulin). Pro pochopení mechanismu působení insulinu a IGF je důležité porozumět, které oblasti ve struktuře hormonů jsou důležité pro vazbu na receptory a pro vyvolání specifických účinků. Jednou z oblastí, kterou se insulin a IGF výrazně liší, jsou D-domény IGF-1 a -2, které zcela chybí v insulinu. Z těchto důvodů jsme se rozhodli připravit analogy insulinu s prodlouženým řetězcem A o D-domény IGF či jejich fragmenty s cílem definovat vliv těchto domén na vazebnou specificitu vůči receptorům...
|
host ::
RSS.